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Elisa试剂盒试验标准操作步骤@公司资讯

阅读人数:188 发布时间:2020/7/28 10:35:19

   【早新闻】728日周二早读分享,Elisa试剂盒试验标准操作步骤@公司资讯,Elisa试剂盒试验标准操作步骤有以下两种方法可作为参考,就是试验还是按照说明书的方法来进行:

一、Elisa试剂盒试验标准操作步骤@公司资讯方法一,用于检测未知抗原的双抗体夹心法,就是我们常常说到的双抗夹心法:

1.包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为110μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)

2.加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)

3.加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml37℃孵育0.51小时,洗涤。

4.加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml371030分钟。

5.终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

6.结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O?D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O?D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

 

二、Elisa试剂盒试验标准操作步骤@公司资讯方法二,用于检测未知抗体的间接法,也就是经常说到的间接法。具体间接法可以索要说明书,因为常用的是双抗夹心法,在此就不多做介绍。

   

三、试剂器材的准备

1. 试剂,包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液),方法:Na2CO1.59克,NaHCO2.93克,加蒸馏水至1000ml

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