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乌鲁木齐人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)检测原理
阅读次数:1681次 发布时间:2022/12/30 14:53:57
人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA检测试剂盒
检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并che底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
ELISA实验中血清的采集、处理和保存;
1、真空采血针采集2ml新鲜血液,加入无菌试管中;
2、采血后室温静置1小时;
3、将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心10min,,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。
4、取上清。
分装冻存备用,
2-8℃下,可放置保存24-48小时;
-20℃下,可放置保存1个月;
-70℃下,可放置保存6个月;
5、根据你的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。
大部分ELISA检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的 ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。此外还应避免细菌污染,因为菌体中可能含有含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。血清标本宜在新鲜 时检测。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。
原创作者:上海极威生物科技有限公司
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