人L选择素（L-Selectin）ELISA检测试剂盒

使用说明书

检测原理

试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人L选择素（L-Selectin）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并che底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的人L选择素（L-Selectin）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

ELISA酶免试剂盒实验分析步骤

1实验准备

1.1预xian进行编号，标记标准品和样品的位置，推荐进行双孔检测（每次实验都须做标准曲线）；

1.2使用前将所有试剂回升至室温,取所需数量的微孔条，将多余板条用试剂盒提供的自封袋重新密封同时排除里面空气，并立即放回2-8℃干燥保存。

2分析步骤

2.1在标准品孔中加入50µl各标准品溶液，在各样品孔中加入50µl样品溶液；

2.2在所有孔中加入50µl的呕吐毒素酶标记物溶液，轻微晃动反应板使之che底混匀，室温下（20-25℃）温浴40min；

2.3甩干孔中液体，用洗涤工作液（250ul/孔）洗涤微孔板4-5次，zui后一次应在吸水纸上拍打以wan全除去孔中液体；

2.4洗涤程序完成后，立即用微量移液器在每个微孔中先加入50µl底物液A，再加 50µl底物液B，轻微晃动使之混匀；

2.5室温下（20-25℃）温浴15min（若颜色较浅可适当延长至20min），每孔中加入50µl终止液，混匀，在450nm下检测吸光度，结果在5min内读取。

10 结果计算

推荐使用快灵Log/Logit计算程序对检测结果进行计算，将检测OD均值和标准品浓度输入，即可自动获得检测结果，再乘以稀释倍数，即为样品种呕吐毒素浓度。

11 试剂盒其他参数

本试剂盒检测下限为 20ppb

B0 吸光度值应大于 0.8，小于 0.8 认为试剂已变质不可用

试剂盒吸光度板内误差小于 8%，板间误差小于 15%

用本说明书提供的样本提取方法回收率为 95%±15%

12 分析限制

本试剂盒检测为阳性的样品，建议用其他方法如HPLC加以确认。

原创作者：上海极威生物科技有限公司