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细胞硬脂酰辅酶 A 去饱和酶(STEAROYL COA DESATURASE)活性光谱法定量检测试剂盒产品说明书
阅读次数:1578次 发布时间:2022/12/26 15:15:13
主要用途
细胞硬脂酰辅酶 A 去饱和酶(STEAROYL COA DESATURASE)活性光谱法定量检测试剂是一种旨在通过底物硬脂酰辅酶 A 诱导还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸所还原的细胞色素 b5 的再氧化后吸光峰值的降低,即采用光谱法定量测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种原代细胞裂解萃取液样品(动物、人体)、纯化微粒体样品硬脂酰辅酶 A 去饱和酶的活性检测,以及抑制剂筛选。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景
硬脂酰辅酶A去饱和酶(stearoyl CoA desaturase;SCD;EC1.14.19.1),又称为Δ9去饱和酶(delta-9 desaturase),是四类去饱和酶(Δ9、Δ6、Δ5、Δ4),一种内质网整合性膜蛋白,参与内源性或外源性脂肪酸代谢的关键酶。通过限速催化氧化反应,在9号位上引入双键,由饱和脂肪酸底物,例如棕榈酸辅酶A(palmitoyl CoA)和硬脂酸辅酶A(stearoyl CoA),生物合成不饱和单脂肪酸,例如棕榈油酸辅酶A(palmitoleoyl CoA)和油酸辅酶A(oleoyl CoA),后者成为甘油三脂、胆固醇酯、磷脂、腊酯等脂类生物合成的底物,调节信号传导和细胞分化。哺乳动物的硬脂酰辅酶A去饱和酶分成5种亚酶:其中小鼠4种(SCD1至SCD4)、大鼠2 种(SCD1、SCD2)、人体2种(SCD1和SCD5)已经克隆证实。人体SCD1存在于大多数组织,而SCD5主要分布在脑组织和胰腺组织中。人体SCD1的活性与血清甘油三脂、极低密度脂蛋白(VLDL)水平直接相关,同时影响血清高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、总胆固醇水平,以及胆固醇转运、不饱和单脂肪酸的分泌和产生、细胞分化、胰岛素敏感性等。硬脂酰辅酶A去饱和酶成为药物靶标,用于治疗心血管疾病和肥胖症等。基于氧化型细胞色素b5(oxidized cytochrome b5),在还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide;NADH)的存在下,受到内源性细胞色素b5还原酶的催化,转化为还原型细胞色素b5(reduced cytochrome b5),进而底物硬脂酰辅酶A,在硬脂酰辅酶A去饱和酶的催化下,转化为油酸辅酶A,同时还原型细胞色素b5再次被氧化(reoxidation)为氧化型细胞色素b5,在分光光度仪下,出现吸光值的变化(424nm 波长),来定量测定硬脂酰辅酶A去饱和酶的活性。其反应系统为:
产品内容
清理液(Reagent A) 毫升
裂解液(Reagent B) 毫升
缓冲液(Reagent C) 毫升
反应液(Reagent D) 微升
底物液(Reagent E) 微升
阴性液(Reagent F) 毫升
产品说明书 1 份
保存方式保存清理液(Reagent A)在 4℃冰箱里,其余的保存在-20℃冰箱里;有效bao证 6 月
用户自备
1.5 毫升离心管:用于样品操作的容器
15 毫升锥形离心管:用于样品操作的容器
细胞刮脱棒:用于细胞脱离
DOUNCE 匀浆器:用于裂解细胞
4℃(微型)台式离心机:用于样品处理
4℃超速离心机:用于样品处理
恒温水槽或培养箱:用于样品反应孵育
比色皿或 96 孔板:用于光谱分析的容器
分光光度仪或酶标仪:用于光谱分析
原创作者:上海极威生物科技有限公司
联系人:陈经理(在阿仪网上看到的)
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